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        細胞瞬時轉染技術服務

        細胞瞬時轉染技術服務?

        服務編碼

        項目名稱

        項目報價

        項目周期

        BT5001

        細胞培養

        2000元

        1-2周

        BT5002

        細胞瞬時轉染

        3000元

        1-2周

        BT5003

        穩定細胞系構建

        咨詢

        咨詢

        一、服務內容

        1、細胞轉染和穩定表達細胞株篩選

        通過轉染試劑或電穿孔方式等方式,將目的基因導入貼壁細胞或懸浮細胞24-48小時后,目的基因即在細胞內表達。此時為了建立穩定細胞系,可根據不同基因載體中所含的抗性標記,選用相應的藥物對靶細胞進行篩選,從而得到穩定表達外源基因的細胞克隆。觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能(短時間即可進行觀察,但效應會很快丟失)。

        2、針對不同種類細胞使用藥物,低氧,壓力等外源因素進行刺激等處理,建立相關的細胞模型,從而進行后續的研究工作。

        二、樣品要求(樣品處理及保存見附件)

        1、干冰運輸:取對數生長期的細胞,消化后低速離心1000rpm,5min收集細胞,加入適量配制好的凍存液后吹打均勻。將細胞分裝入凍存管中,標明細胞的名稱、細胞代次、凍存時間及操作者;放4℃冰箱30min,-2030min1h,-80℃過液,然后放入液氮罐;細胞數目不少于5×106/ml;

        2、常溫運輸:細胞貼壁覆蓋瓶底面積達40%以上時,裝滿培養液,瓶口用封口膜封好,裝入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞滿,讓瓶子固定在盒子中。

        三、服務特點

        1、針對不同細胞系篩選合適的轉染試劑和質粒濃度配比,提高轉染效率和蛋白表達量

        2、豐富的抗生素篩選經驗和單細胞克隆鑒定方法提高實驗效率

        3、構建的穩定表達細胞株可穩定傳代,極少發生性狀丟失

        四、收費標準

        服務項目

        收費標準¥

        實驗周期

        蛋白瞬時表達或敲低

        基因表達或敲低載體構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        載體轉染

        3000/樣品

        1

        Western Blot檢測蛋白表達或敲低

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白穩定表達細胞株構建(混合克?。?/span>

        表達載體構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        轉染和抗生素篩選

        40000/細胞系

        3-4

        Western Blot檢測穩定細胞株蛋白表達

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白穩定表達細胞株構建(單克?。?/span>

        表達載體構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        轉染和抗生素篩選

        50000/細胞系

        6-8

        Western Blot檢測穩定細胞株蛋白表達

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白敲低細胞系構建(單克?。?/span>

        shRNA表達載體的構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        轉染和抗生素篩選

        60000/細胞系

        6-8

        Western Blot檢測敲低細胞株蛋白表達

        2000/目的蛋白/

        2

        蛋白真核表達(分泌表達)

        分泌型表達載體的構建

        請參見載體構建目錄

        2-3

        質粒大提(含去內毒素)

        700/質粒

        1

        細胞轉染

        3000/質粒

        2

        蛋白表達檢測(Western Blot ELISA

        2000/目的蛋白/膜;600/

        2

        蛋白表達和純化

        20000/mg

        2

        五、客戶提供材料
        1
        、待克隆基因和載體信息,待敲低基因信息和shRNA序列信息(如無相關shRNA序列信息,本公司可代為設計并收取相關費用;

        2、待轉染細胞株(如需使用常用腫瘤細胞株,如293/293T、HeLa等可由本公司提供);

        3、陽性對照樣品(盡量提供)

        4、相關文獻(可選)

        六、提交給客戶結果

        1、構建完成的載體和甘油菌株;

        2、完整測序報告和序列堿基圖

        3、載體真核表達鑒定結果

        4、載體真核表達蛋白

        5、穩定表達細胞株>1×107

        6、穩定敲低細胞株>1×107

        7、完整實驗報告(包括基因擴增圖,細胞株過表達和敲低檢測結果圖等)


        皖公網安備 34010402700852號

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